液相色譜-質譜聯用技術在藥物微量雜質分析中的應用

液相色譜-質譜(LC-MS)聯用技術是以HPLC為分離手段、MS為檢測器的綜合分析技術，集LC的高分離能力與MS的高靈敏度于一體，具有其他分析方法所不能比擬的優點，也是藥物雜質分析中的常用技術之一。LC-MS技術也可以隨時檢測藥物合成過程中的中間體、副產物或降解產物。

在藥物的研發過程中，藥品質量研究的關鍵問題之一是雜質的控制，任何影響藥物純度的物質都被稱為雜質。臨床前CRO公司美迪西的分析化學和純化分離團隊可以為客戶提供高質量的分析和純化分離服務。在藥物雜質分析中，雜質譜的質控策略是根據藥物中的每一個雜質的活性逐一制定質量控制限度，因此更加嚴格規范。

雜質譜分析主要包括2個方面，一是依據藥物結構、理化性質，分析藥物合成工藝、制劑工藝中可能產生的雜質；二是考察藥物穩定性試驗和強制降解試驗產生的雜質。因為藥物雜質在藥物中的含量較低，所以檢測手段至關重要，必須選擇靈敏度高、專屬性強、重復性好的方法。

對于易揮發且熱穩定性的物質和殘留溶劑的檢測，一般使用氣相色譜法（GC）。近年來，色譜法在各國藥典中得到了廣泛應用，其中有關物質分析方法的主流還屬液相色譜技術。HPLC測定有關物質的定量方法主要有雜質對照品法(外標法)、加校正因子和不加校正因子的主成分自身對照法以及面積歸一化法。如采用HPLC法定量測定艾普拉唑片有關物質，并進行方法學驗證。

目前色譜聯用技術在藥物雜質檢測方面有很大的發展潛力。人用藥品注冊技術要求協調會（ICH）明確規定：每日大劑量不超過2g的原料藥中含量大于0.1%的有關物質須鑒定其結構。將色譜法與具有定性能力的光譜法相結合，不僅具有較高靈敏度和選擇性，還能夠給出豐富的結構信息，提高其結構鑒定能力。

液相色譜-質譜聯用（LC/MS）技術主要分為高分辨率質譜（HRMS）、多級質譜、氫/氘轉換質譜3類，該技術具有的靈敏度、高選擇性和快速的特點，避免了樣品復雜的前處理過程，已經成為藥物中微量雜質分析和結構鑒定的shou選。

1、HPLC-MS/MS技術在鹽酸頭孢替安酯藥物雜質分析中的應用

采用HPLC-MS/MS聯用技術對鹽酸頭孢替安酯中的未知雜質結構進行分析，經梯度洗脫，使藥物的主成分和相關雜質得到有效分離。通過對鹽酸頭孢替安酯和有關雜質的液相色譜圖及液相色譜峰對應的質譜圖進行分析和歸納，推測在鹽酸頭孢替安酯樣品中的主要雜質，這為鹽酸頭孢替安酯的生產、工藝改進和質量控制提供了參考。

2、HPLC/MS聯用技術在甲磺酸伊馬替尼藥物雜質分析中的應用

采用HPLC-MS聯用技術對甲磺酸伊馬替尼中基因毒性雜質的含量進行測定，并在選擇離子檢測的模式下靈敏、準確、快速地檢測出該基因的毒性雜質，但在檢測過程中,要注意不同溶劑對雜質穩定性造成的影響，防止出現假陰性結果。

3、HPLC-MS/MS聯用技術在馬來酸桂呱齊特原料藥雜質分析的研究

采用HPLC-MS/MS聯用技術對馬來酸桂呱齊特的原料中間體—氯乙酚毗咯烷和一呱嗦乙酚基毗咯烷的含量進行測定，考察在馬來酸桂呱齊特原料中兩種中間體的殘留情況，為特定合成工藝的質量控制和質量標準的建立提供依據，同時，也為無紫外吸收的合成中間體檢測和質控提供了參考依據。

4、HPLC-MS聯用技術在原料中雜質與制劑中雜質的相關性的研究

在一些原料來源特殊的制劑質量控制中，HPLC-MS聯用技術可較好地分辨原料中雜質與制劑中雜質的相關性，為控制制劑質量、工藝優化和合理貯存提供參考。

如氫嗅酸高烏甲素是從植物中提取的有效成分，在純化過程中，其可能會殘留其他生物堿。通過對氫嗅酸高烏甲素原料藥進行分析，發現其中有種雜質主要來源于原植物的提取殘留。除了注射用粉針劑外，其他注射液均含有原料藥中未出現的降解雜質刺烏寧，這可能是由于注射液和葡萄糖注射液在生產工藝中，進行了高溫加熱滅菌的緣故，從而導致主成分酯鍵水解斷裂，生成了該降解產物。而注射用粉針劑的凍干工藝則有效避免了該雜質的產生，因此該藥在生產和貯存過程中，應注意避免溫度過高。

HPLC-MS在藥物雜質分析中的應用決定了它是控制藥物質量的重要分析工具。運用HPLC-MS聯用技術進行藥物雜質分析，能夠為后續的藥物雜質分析提供寶貴的經驗，值得推廣和應用。